猪链球菌3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶的原核表达、活性检测和同源建模

• 作者: 付强 刘璨颖 徐卓菲
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 链球菌 HMGR 原核表达 蛋白质纯化 酶活测定 同源建模
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 2318-2324
• 页数: 7页
• 分类号: S852.61
• 字数: 4536字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.11.021

摘要

旨在以猪链球菌(Streptococcus suis,S.suis)3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)为药靶,给S.suis病防治研制新型抗菌药提供理论和试验基础.原核表达了S.suis HMGR,用Ni-NTA树脂对重组蛋白质进行了纯化,并用分光光度法测定了其酶活力.此外,运用CLUSTALW对同源HMGR氨基酸序列进行多序列比对.通过SWISS-MODEL对S.suis HMGR三维结构进行同源建模,并用PROCHECK评价模型的质量.酶活力测定结果显示,催化HMG-CoA还原为甲羟戊酸的反应中,S.suis HMGR最佳反应温度和pH分别为37℃和5.0,其Vmax和Km为846 U· mg-1和0.213 mmol·L-1.经分析显示,肺炎链球菌HMGR晶体结构(PDB ID:3QAE_A)是构建S.suis HMGR三维结构的最佳模板.构建的三维结构模型经质量评估证实为可靠的理论模型,将有助于虚拟筛选出对抗S.suis感染的新型抗生素,酶活力的测定为用试验手段验证S.suis HMGR抑制剂的有效性提供了可行性的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐卓菲	华中农业大学动物科学与动物医学院	8	48	4.0	6.0
2	付强	佛山科学技术学院生命科学与工程技术学院	16	29	3.0	5.0
3	刘璨颖	佛山科学技术学院生命科学与工程技术学院	6	14	2.0	3.0