花生Δ9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因启动子的克隆及功能分析

• 作者: 孙子淇 张忠信 张新友 汤丰收 石磊 苗利娟 董文召 高伟 黄冰艳 齐飞艳
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 花生 Δ9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因(SAD) 启动子 基因组步移 GUS报告基因
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种?种质资源?分子遗传学
• 页码范围: 1629-1637
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2016.01629

摘要

Δ9-硬脂酰-ACP 脱氢酶(SAD)是决定植物体内饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸比值的关键酶。以花生品种豫花9326基因组DNA为模板,通过基因组步移技术,克隆到花生Δ9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因(AhSAD)起始密码子ATG上游720 bp片段,利用5￠ RACE方法获得了该基因的5￠ UTR序列,通过序列比对确定720 bp片段为AhSAD启动子区域。PLACE在线启动子预测分析表明,该序列具有真核生物启动子必需的核心元件TATA-box和CAAT-box,含有多个与光诱导和激素响应相关顺式序列元件。将 AhSAD 启动子片段替换 pBI121质粒中的 CaMV35S 启动子驱动下游GUS基因表达,构建植物表达载体pBI-PAhSAD。通过农杆菌介导法转化拟南芥和在花生不同组织中瞬时表达,利用GUS组织化学染色研究其表达特性。表明在拟南芥和花生受体中, AhSAD启动子主要调控下游基因在根、茎、叶片和子叶中表达,在花生的果针中也检测到GUS活性；拟南芥的茎生叶只有叶脉中具有GUS活性,而花生整个叶片中都具有GUS活性。