病毒性出血性败血症病毒单链抗体的原核表达及其功能鉴定

• 作者: 于海洋 侯竹美 张全启 王宏华 王志刚 王旭波 齐洁
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鱼 病毒性出血性败血症病毒 单链抗体
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 页码范围: 128-134
• 分类号: Q785|S941
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20150910079

摘要

为制备病毒性出血性败血症病毒(VHSV)单链抗体(single chain variable fragment antibody,ScFv)并鉴定其生物学功能,本研究提取抗VHSV单抗1G5的杂交瘤细胞株总RNA并反转录获得cDNA模板,通过PCR扩增VHSV抗体的轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)编码序列,将其拼接成单链抗体ScFv基因后插入载体pET28a中,构建原核表达重组质粒并在大肠杆菌中诱导表达.结果表明,单链抗体主要以可溶性形式表达,分子量约28 ku,能特异性识别VHSV病毒的G蛋白并对VHSV病毒具有体外中和活性,其对VHSV病毒的G蛋白亲和力(KD)达到1.4×10-8 M.单链抗体ScFv的制备为进一步研究VHSV的治疗性抗体、快速诊断试剂奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	齐洁	中国海洋大学海洋生命学院	20	390	10.0	19.0
2	张全启	中国海洋大学海洋生命学院	35	632	12.0	24.0
3	于海洋	中国海洋大学海洋生命学院	10	31	3.0	5.0
4	侯竹美	青岛农业大学海洋科学与工程学院	12	25	3.0	4.0
5	王志刚	中国海洋大学海洋生命学院	19	214	8.0	14.0
6	王旭波	中国海洋大学海洋生命学院	9	44	4.0	6.0
7	王宏华	中国海洋大学海洋生命学院	1	1	1.0	1.0