猪弓形虫和附红细胞体双重PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 于新友 张颖 李天芝 李峰 沈志强
• 来源期刊: 养猪
• 学科: 农学
• 关键词: 猪弓形虫 附红细胞体 双重PCR 检测
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 猪病防制与保健 [由哈尔滨维科生物技术开发公司协办]
• 页码范围: 121-124
• 页数: 4页
• 分类号: S858.28
• 字数: 3598字
• 语种: 中文

摘要

根椐GenBank中登录的猪弓形虫和附红细胞体核苷酸序列，分别设计2对引物，在建立各病原单项PCR技术的基础上，优化双重PCR反应条件，建立了2种病原的双重PCR检测方法，用这2对引物对同一样品中的弓形虫和附红细胞体核酸模板进行双重PCR扩增，结果可同时扩增弓形虫的241 bp，附红细胞体的748 bp的特异性片段，而对其它5份猪病原及对照的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明，该双重PCR技术能检出0.1 pg的弓形虫和0.1 pg的附红细胞体模板。用72份临床病料对此研究双重PCR技术和单项PCR技术进行对比验证，结果显示，两者总符合率为100%。表明建立的双重PCR检测方法具有特异、快速、准确的特点，可用于对这两种病原的同时检测和鉴别诊断。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈志强		525	1950	18.0	25.0
5	李峰		231	514	10.0	14.0
6	张颖		74	180	7.0	10.0
7	李天芝		193	258	6.0	8.0
8	于新友		198	275	6.0	8.0