重叠PCR法构建PTEM基因3位点的融合重组载体

• 作者: 周晶 张宏全 彭华 郭紫芬 龚咏晴
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: PTEN基因 重叠PCR 子宫内膜癌 载体构建
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 788-790
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 2420字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2016.10.22

摘要

目的 构建包含与子宫内膜癌相关的PTEN基因3位点的重组pMD19-exon 5-exon 8载体.方法 以健康人全基因组DNA为模板,设计2对有重叠区的特异性引物分别扩增PTEN基因的exon 5和exon 8片段,利用重叠PCR技术,将exon 5和exon 8片段进行连接,再将连接产物exon 5-exon 8片段插入pMD19-T质粒,构建成重组pMD19-exon 5-exon 8载体,转化入大肠埃希菌感受态细胞DH5α进行表达,利用菌液PCR和基因组测序进行鉴定.结果 exon 5-exon 8片段经凝胶电泳检测,可在1 253 bp处见一清晰的目的条带,PTEN基因融合重组质粒经菌液PCR及测序结果鉴定,均与预期结果一致.结论 应用重叠PCR法将exon 5和exon 8片段进行融合,并成功构建了PTEN基因融合重组表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭华	南华大学药物药理研究所	13	37	4.0	6.0
2	郭紫芬	南华大学药物药理研究所	32	133	7.0	9.0
3	周晶	南华大学药物药理研究所	7	9	2.0	3.0
4	张宏全	南华大学药物药理研究所	2	0	0.0	0.0
5	龚咏晴	南华大学药物药理研究所	4	9	2.0	3.0