黄精多糖调控骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化

• 作者: 严芳娜 农梦妮 宗少晖 彭小明 曾高峰 李柯柯 杜力
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 骨细胞 黄精多糖 骨髓间充质干细胞 成骨分化 Wnt/β-catenin 骨质疏松 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2016,（15）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 骨组织构建
• 页码范围: 2133-2139
• 页数: 7页
• 分类号: R318
• 字数: 7670字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.15.001

摘要

背景：骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能。黄精多糖可能通过Wnt/β-catenin信号通路促进小鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化。<br>　　目的：探讨黄精多糖对小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响。<br>　　方法：培养小鼠骨髓间充质干细胞，在传统成骨诱导培养基诱导下给予5，10，25，50 mg/L黄精多糖进行干预，不加黄精多糖作为对照组，显微镜下观察细胞形态变化。PNPP法检测碱性磷酸酶活性；观察细胞发生矿化并进行茜素红染色，记录矿化结节数和面积分数；qRT-PCR 检测成骨相关基因碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素mRNA表达；采用qRT-PCR和Western Blot分别检测β-catenin基因和蛋白表达水平；采用双荧光素酶报告基因检测系统检测下游β-catenin/TCF的转录活性。<br>　　结果与结论：①与对照组相比，不同质量浓度的黄精多糖以剂量依赖性的方式提高碱性磷酸酶活性(P <0.05)，显著增强细胞的矿化能力，明显提高碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素基因的表达(P<0.05)；②诱导后β-catenin mRNA在第3天表达最高，黄精多糖在促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的过程中还能显著上调β-catenin的表达(P <0.05)，促使含有TCF结合位点的荧光素酶报告基因(TOPFlash)的高表达(P<0.05)；③说明黄精多糖通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。