HPV E7与子宫颈上皮内瘤样病变细胞DNA损伤应答的相关性研究

• 作者: 唐子执 曹寒雨 楼江燕 王小军
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: E7 原代细胞培养 DNA损伤
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 837-842
• 语种: 中文

摘要

目的 通过原代培养HPV阳性的宫颈上皮内瘤变Ⅲ度(CINⅢ)的成纤维细胞与HPV阴性的小儿包皮成纤维细胞,探索HPV E7在DNA损伤应答过程中的作用.方法 选取临床病理确认为HPV16阳性的CINⅢ新鲜宫颈组织和HPV16阴性的小儿包皮组织,组织块经胶原酶A消化后培养,用慢病毒E7或pLV感染HPV16-成纤维细胞,用离子射线(X光,2 Gy或5 Gy)分别照射HPV16阴性与HPV16阳性细胞以及经pLV或E7慢病毒感染的细胞0～8 h,诱导细胞DNA双链断裂,采用间接免疫荧光法检测DNA双链断裂应答相关蛋白53BP1、BRCA1、NBS1、RPA32的应答特征.结果 成功从宫颈上皮内瘤变组织及小儿包皮组织原代培养出HPV16阳性及HPV16阴性的成纤维细胞.间接免疫荧光染色发现X光照射后,HPV16阳性细胞中53BP1、BRCA1、NBS1、RPA32灶点多于HPV16阴性细胞(P＜0.05),E7感染细胞中53BP1、RPA32、NBS1灶点少于pLV感染细胞(P＜0.05),均为6 h(2 Gy)或4 h(5 Gy)达峰.结论 利用原代培养CIN成纤维细胞成功建立了研究DNA损伤中E7作用的模型,在宫颈癌前病变发展过程中,HPV E7能够抑制DNA双链断裂修复应答反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	楼江燕	四川大学华西第二医院妇产科	23	114	5.0	10.0
2	曹寒雨	四川大学华西第二医院妇产科	3	8	1.0	2.0
3	王小军	四川大学华西第二医院西部妇幼研究院基因组稳定性实验室	5	4	1.0	2.0