姜黄素对脂多糖诱导的滋养细胞系HTR-8/SVneo中微小RNA-155表达及细胞凋亡、侵袭的影响

• 作者: 刁振宇 杨沐怿 沈莉 洪国敏 胡娅莉 龚萍
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 关键词: 先兆子痫 滋养层 姜黄素 微RNAs 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 859-864
• 页数: 6页
• 字数: 5120字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0529-567x.2016.11.011

摘要

目的探讨姜黄素对脂多糖（LPS）诱导的滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞中微小RNA-155（miR-155）表达、细胞凋亡和侵袭的影响。方法体外培养滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞。实验共4组：姜黄素+LPS组（姜黄素浓度分别为12.5、25、50μmol/L预处理后，加入100 ng/ml LPS）、LPS组（加入100 ng/ml LPS）、重组腺病毒组（加入Ad-miR-155，感染复数为100）和空白对照组。采用实时荧光定量PCR、荧光素酶报告基因活性检测法和蛋白印迹法检测姜黄素+LPS组、LPS组和空白对照组细胞的miR-155表达水平、荧光素酶转录活性及核因子κB（NF-κB）蛋白的表达水平；细胞凋亡酶联免疫法和细胞侵袭试验检测姜黄素+LPS组、LPS组、重组腺病毒组和空白对照组细胞凋亡和侵袭能力的情况。结果（1）实时荧光定量PCR技术结果显示，LPS组HTR-8/SVneo细胞中miR-155的表达水平为空白对照组的（2.13±0.22）倍，两组比较，差异具有统计学意义（P<0.01）；12.5、25、50μmol/L姜黄素+LPS组HTR-8/SVneo细胞中miR-155的表达水平分别为LPS组的（0.37±0.08）、（0.68±0.14）、（0.49±0.09）倍，分别比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。（2）荧光素酶报告基因活性检测法显示， LPS组荧光素酶的转录活性为空白对照组的（2.25±0.56）倍，12.5、25、50μmol/L姜黄素+LPS组荧光素酶转录活性分别为LPS组的（0.80±0.07）、（0.74±0.05）、（0.49±0.19）倍，差异均有统计学意义（P均<0.05）。（3）蛋白印迹法检测显示，LPS组HTR-8/SVneo细胞中p65蛋白的表达水平为1.50±0.22，明显高于空白对照组（0.95±0.25，P<0.01）。不同浓度姜黄素+LPS组，姜黄素浓度为12.5μmol/L时，p65蛋白表达水平为0.31±0.07，与LPS组相比，下调最明显（P<0.01）；浓度为25、50μmol/L时，蛋白表达水平分别为0.75±0.14、0.49±0.08，分别与LPS组比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。（4）细胞凋亡酶联免疫法检测显示，空白对照组的吸光度（A）值为0.89±0.17，LPS组、重组腺病毒组的A值分别为2.02±0.35和1.67±0.48，分别与空白组比较，差异有统计学意义（P均<0.05）。25、50μmol/L姜黄素+LPS组的A值分别为0.74±0.05、0.49±0.09，细胞凋亡被抑制，分别与LPS组（设定为1.00）比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；12.5μmol/L姜黄素+LPS组的A值为0.80±0.07，细胞凋亡有抑制趋势，但与LPS组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。（5）细胞侵袭试验显示，LPS组穿膜细胞数量为（47±8）个，重组腺病毒组为（60±14）个，分别与空白对照组[（169±18）个]比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；12.5、25μmol/L姜黄素+LPS组的穿膜细胞数量分别为（143±10）、（137±10）个，与LPS组比较明显增加（P均<0.05）；而50μmol/L姜黄素+LPS组，穿膜细胞数量为（55±7）个，与LPS组比较有所增加，但差异无统计学意义（P>0.05）。结论姜黄素通过抑制NF-κB信号通路，下调LPS诱导的NF-κB和miR-155的表达水平，从而抑制绒毛外滋养细胞过度凋亡，保护其侵袭能力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡娅莉	南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科	229	1922	19.0	33.0
2	刁振宇	南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科	10	37	4.0	6.0
3	沈莉	南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科	8	8	2.0	2.0
4	龚萍	南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科	2	18	2.0	2.0
5	洪国敏	210023南京中医药大学中西医结合鼓楼临床医学院	1	3	1.0	1.0
6	杨沐怿	南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科	1	3	1.0	1.0