平肝潜阳方含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖、迁移及DNA甲基化水平的影响

• 作者: 万玲 唐涛 方霞 王东生 谢明萱 钟广伟 陈琼
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 血管平滑肌细胞 增殖与迁移 DNA甲基化 平肝潜阳方 DNA甲基转移酶1
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 580-585
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/CJIM.2016.05.0580

摘要

目的 观察平肝潜阳方对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖和迁移的抑制作用及DNA甲基化水平的影响.方法 采用组织贴块法培养VSMCs,制备平肝潜阳方含药血清.将培养细胞分为正常组(原代培育的VSMCs)、模型组、叶酸组及平肝潜阳方组(下称中药组).以AngⅡ作为诱导复制VSMCs增殖及迁移模型,在AngⅡ诱导VSMCs培育24 h后,叶酸组加入40μg/m L叶酸干预48 h,中药组加入5％中药血清干预48 h.采用CCK-8(Cell Counting Kit)试剂盒绘制VSMCs生长曲线,MTT法测定VSMCs增殖活性,体外细胞划痕实验检测细胞迁移情况,以抗5-甲基胞嘧啶(5-mC)抗体进行免疫荧光检测细胞核中胞嘧啶甲基化水平;Real-time q-PCR方法检测DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)mRNA表达水平.结果 AngⅡ在10-6 mol/L浓度下诱导24 h后可促进VSMCs生长.与正常组比较,模型组细胞增殖活性及迁移数量明显增加,DNA甲基化水平明显降低(P ＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,叶酸组及中药组VSMCs生长、细胞增殖活性及迁移数量均明显降低,DNA甲基化水平升高(P＜ 0.05,P＜0.01);与正常组比较,模型组VSMCs DNMT1 mRNA表达水平降低(P＜0.01);与模型组比较,叶酸组及中药组VSMCs DNMT1 mRNA表达明显增强(P＜0.01).结论 平肝潜阳方可抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖和迁移,可导致基因组DNA高甲基化,其DNA甲基化水平改变可能与DNMT1表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈琼	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	82	547	12.0	20.0
2	王东生	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	59	703	14.0	25.0
3	钟广伟	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	62	784	18.0	25.0
4	唐涛	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	74	528	13.0	16.0
5	万玲	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	7	41	3.0	6.0
6	方霞	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	3	5	1.0	2.0
7	谢明萱	中南大学湘雅医院/中南大学第一临床学院	4	69	2.0	4.0