视网膜色素上皮细胞吞噬功能与 MERTK-Ras-肌球蛋白通路关系的研究

• 作者: 孙昱昭 张若霜 谷峰
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 关键词: 视网膜色素上皮 吞噬 MERTK Ras 肌球蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 28-33
• 页数: 6页
• 字数: 6559字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3980/j.issn.1672-5123.2016.1.07

摘要

目的：：研究视网膜色素上皮( retinal pigment epithelium, RPE)细胞吞噬功能与 MERTK 受体及其下游信号通路Ras-MEK-MLCK-肌球蛋白的关系。方法：用视细胞外节膜盘( rod outer segments,ROS)于37℃孵育离体培养的3~5代C57小鼠RPE细胞,在孵育0、30、60、120、180、240 min终止吞噬反应。双重荧光标记法检测RPE细胞吞噬动力学；以MERTK及Ras抗体、磷酸化MEK及MLCK抗体应用Western-Blot方法检测不同孵育时间(30、60、120、180 min ) MERTK、Ras、MEK 及 MLCK的激活状态；以瞬时转染质粒方法抑制Ras及MERTK基因表达后,再次以 Western-Blot 方法检测对应时间MERTK-Ras通路激活状态及吞噬功能的变化。结果：C57小鼠RPE细胞吞入ROS发生在孵育30min,并在3h达到饱和。在吞噬过程中,随着孵育时间的延长, RPE细胞MERTK、Ras、MEK和MLCK的蛋白表达水平不断增多(与对照组相比,P<0.05)。 Ras及MERTK干扰后的RPE细胞与ROS共孵育(30、60、120、180min)的全过程中,MERTK、Ras、MEK 和 MLCK 的蛋白表达及 ROS 的吞入数量始终维持较低水平,仅在孵育180 min 见到少量ROS吞入；与未转染 RPE 细胞相比, siRas-RPE 细胞及siMERTK-RPE细胞与ROS共孵育120、180min时,MERTK、Ras、MEK及MLCK的蛋白表达量均明显减少(P<0.05)。结论：Ras-MEK-MLCK-肌球蛋白通路是鼠RPE细胞吞噬过程中MERTK受体激活的下游信号通路。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙昱昭	中国医科大学附属一院眼科	8	22	3.0	4.0
2	谷峰	中国医科大学附属一院眼科	9	56	4.0	7.0
3	张若霜	中国医科大学附属一院眼科	2	9	1.0	2.0