一种快速测定牦牛皮胶和牛皮胶中18种氨基酸的PITC主前衍生HPLC法

• 作者: 杜玉枝 杨红霞 毕宏涛 肖远灿 许梦琪 魏立新
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 化学
• 关键词: 牦牛皮明胶 牛皮明胶 氨基酸 柱前衍生 异硫氰酸苯酯 高效液相色谱法
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1563-1568
• 页数: 6页
• 分类号: O657.72|O629.711
• 字数: 4254字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2016.12.008

摘要

建立一种有效测定牦牛皮胶与牛皮明胶中18种氨基酸含量的异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生-高效液相色谱法.对PITC衍生方法进行了优化,方法无需干燥和有机溶剂萃取过量PITC的步骤.牦牛皮使用胃蛋白酶在37℃下酶解72 h,酶解物冷冻干燥保存.样品用6.0 mol/L盐酸,110 ℃水解后,以PITC为衍生试剂进行衍生处理.采用Shiseido Capcell Pak C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为0.14 mol/L乙酸钠-0.5 mL/L三乙胺水溶液(pH 6.08)和60％乙腈,梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长为254 nm.18种氨基酸在0.2～80 mg/L浓度范围内与峰面积间的线性关系良好(r2≥0.999 2),检出限为0.01 ～0.39 mg/kg,平均回收率为78.7％-121.0％,相对标准偏差(RSD)为0.05％ ～ 12.0％.结果表明,该方法衍生化步骤简单、灵敏度高、前处理时间短,可用于牛科动物皮胶中多种氨基酸成分和含量的测定.