乌拉尔甘草离体再生与遗传转化技术的研究

• 作者: 张芮 段艳慧 胡海英 谢应忠
• 来源期刊: 草业学报
• 关键词: 乌拉尔甘草 茎段 不定芽分化 遗传转化 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 50-56
• 页数: 7页
• 字数: 5008字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11686/cyxb2015590

摘要

研究乌拉尔甘草离体再生受体系统和遗传转化技术方法，为甘草基因工程育种提供前期实验基础。以乌拉尔甘草茎段为外植体，试验筛选最适不定芽分化培养基和增殖壮苗培养基；以乌拉尔甘草茎段为受体，利用农杆菌介导法对乌拉尔甘草进行 GUS 和GFP 基因的遗传转化研究。结果表明，以乌拉尔甘草去腋芽茎段为外植体，其不定芽最适分化和增殖培养基配方为 MS＋0．1 mg／L TDZ＋0．1 mg／L 6BA＋0．1 mg／L IBA，不定芽分化率达38．8％，增殖倍数3．67，适宜的壮苗培养基为 MS＋0．5 mg／L NAA。与去腋芽茎段相比，带腋芽茎段的不定芽分化率达100％，能够在含抗生素的选择培养基 MS＋0．1 mg／L TDZ＋0．1 mg／L 6BA＋0．1 mg／L IBA＋50 mg／L Kan＋250 mg／L Car 上存活，确定为最适转化受体；带腋芽茎段在分化培养基上预培养7 d 后，经 OD600＝0．6的菌液侵染10 min，共培养3 d，在选择培养基上培养20 d，其不定芽分化率为43．75％，经 GFP 荧光检测可得到78．88％的 GFP 基因瞬时表达率；随机选取5株再生转化植株，经 PCR 检测，均有 GFP 和 GUS 基因的目的条带， GFP 基因表达较强烈，初步获得了5个株系的阳性转化植株。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢应忠	宁夏大学农学院	110	1206	18.0	29.0
2	胡海英	宁夏大学农学院	28	255	9.0	15.0
3	张芮	宁夏大学生命科学学院	3	2	1.0	1.0
4	段艳慧	宁夏大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0