牛早期胚胎发育中 AID 基因的表达及其调节区 DNA 甲基化的动态变化

• 作者: 于海泉 奥旭东 王会敏 王杰 萨如拉
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: AID 基因 牛体外受精胚胎 DNA 甲基化
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 242-249
• 页数: 8页
• 字数: 5533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.07.034

摘要

以具有 DNA 主动去甲基化作用的活化诱导胞苷脱氨酶（Activation-induced cytidine deaminase，AID，亦称为AICDA）基因为研究对象，检测其在牛卵母细胞及体外受精胚胎发育不同阶段的表达变化及其调节方式，揭示细胞重编程分子机制。应用 Real-time PCR、BSP（Bisulfite Sequencing PCR）和免疫荧光化学等方法分析 DNA 甲基化对牛早期胚胎发育中 AID 基因表达的影响。结果显示，AID 基因在牛早期胚胎发育中受 DNA 甲基化的调控，AID 基因的 T-DMR（tissue-dependent and differentially methylated region）位于其转录起始位点-88 bp －-431 bp。在牛卵母细胞成熟过程中，T-DMR 第2和第3号 CpG 位点的 DNA 甲基化明显去除，而其他位点都未发生变化。卵母细胞在成熟过程中 AID 基因的积累与 DNA 甲基化状态变化相关。在牛体外受精胚发育早期的各阶段，尽管 AID 基因的表达不同，但 AID 基因 T-DMR 除第2和第3号 CpG 位点一直都维持去甲基化状态外，其他位点始终维持甲基化状态。推测其表达的变化可能是胚胎基因组激活有关。以上研究表明，AID 基因 T-DMR 的低甲基化与其表达存在一定的相关性。通过免疫荧光检测发现，从卵母细胞成熟期到桑椹胚期，AID 蛋白都是均匀分布于细胞核和细胞质中。而囊胚时期大量 AID 蛋白集中于内细胞团，这可能对于内细胞团多能性的维持起重要作用。综上所述，牛卵母细胞成熟中积累的 AID 作用于受精过程，其启动子区的 DNA 去甲基化与 AID 基因的表达有关，胚胎基因组激活后 AID 基因的表达可能与胚胎发育有关。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于海泉	内蒙古大学实验动物研究中心	21	34	4.0	5.0
2	奥旭东	内蒙古大学实验动物研究中心	7	6	1.0	1.0
3	萨如拉	内蒙古大学实验动物研究中心	9	44	3.0	6.0
4	王杰	内蒙古大学实验动物研究中心	6	6	1.0	2.0
5	王会敏	内蒙古大学实验动物研究中心	4	4	1.0	1.0