番鸭细小病毒非结构蛋白B细胞线性抗原表位的鉴定

• 作者: 于天飞 于志丹 樊兴冬 董慧莹 闫冰 黎明
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 番鸭细小病毒 非结构蛋白 抗原表位 鉴定
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 14-19
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 5060字
• 语种: 中文

摘要

为了分析番鸭细小病毒(muscovy duck parvovirus,MDPV) YL08株NS1蛋白(氨基酸序列全长627 aa)抗原表位,本研究设计了一套覆盖整个NS1蛋白的短肽,短肽长为30个氨基酸左右,有10个氨基酸重叠.为了表达这些短肽,共设计合成了31对互补的寡核苷酸片段.每对寡核苷酸片段5'端磷酸化.上述寡核苷酸片段退火后,插入至原核表达载体pET-32a(+)中,经IPTG诱导获得了相应重组蛋白的表达.利用切胶纯化的方法对表达蛋白进行了纯化.应用MDPV YL08株人工感染番鸭血清对表达的31个重组蛋白的抗原性进行了检测,Western blot结果表明,表达的7个融合蛋白NS(481-510)、NS (501-530)、NS (521-550)、NS (541-570)、NS(561-590)、NS (581-610)和NS (601-627)能被MDPV感染血清所识别,而其他融合蛋白不能被MDPV感染血清所识别.同时,上述7个表达的融合蛋白不与灭活MDPV免疫番鸭血清反应.综合上述试验结果,MDPV YL08株NS1蛋白的B细胞线性抗原表位区位于NS1蛋白的羧基末端481 aa～627aa.Dot-ELISA试验表明,重组蛋白NS(501-530)的抗原性相对更强.本研究为建立基于抗原表位的MDPV自然感染和人工免疫番鸭的鉴别诊断方法提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黎明	齐齐哈尔大学计算机与控制工程学院	35	65	4.0	7.0
2	于天飞	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	40	141	6.0	10.0
3	董慧莹	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	5	2	1.0	1.0
4	于志丹	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	17	10	2.0	2.0
5	樊兴冬		6	15	2.0	3.0
6	闫冰	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	5	3	1.0	1.0