双抗原夹心ELISA法检测抗念珠菌烯醇化酶抗体

• 作者: 史利宁 李芳秋 王颖 胡毓安 陈笑 黄梅
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 侵袭性念珠菌病 血清学诊断 烯醇化酶抗体 双抗原夹心ELISA法
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 924-926
• 页数: 3页
• 分类号: R446.5
• 字数: 3099字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2016.12.10

摘要

目的 建立检测抗念珠菌烯醇化酶(Eno)特异性抗体的双抗原夹心ELISA法,并进行临床应用评价.方法 用基因工程制备的重组Eno作为包被抗原和酶标抗原,通过棋盘滴定法对双抗原夹心ELISA法的反应条件进行优化,对方法的敏感性、特异性和精密度进行考察.用双抗原夹心ELISA法测定291例住院患者(侵袭性念珠菌病114例,念珠菌定植82例,细菌感染患者95例)以及200名健康人血清,并与本实验室前期自建的间接ELISA法检测抗Eno抗体的结果进行比较.结果 双抗原夹心ELISA法工作条件为:Eno抗原包被浓度为0.5 μg/mL,酶标抗原1∶4000稀释;封闭液为含50 g/L脱脂奶粉的PBS-T,待测血清稀释度为1∶100.患者血清检测结果显示,批内变异系数(CV)分别为6.8％、7.4％和5.9％;不同批次重复测定15次,其批间CV分别为10.1％、9.6％和12.4％.重组抗原对血清中相应抗体的阻断率为92.2％.通过ROC曲线确定cut off值吸光度(A)为0.209.检测侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)的敏感性和特异性分别为81.6％ (93/114)和94.4％ (356/377),敏感性高于检测抗Eno抗体的间接ELISA法(81.6％ vs 76.1％).结论 建立了双抗原夹心ELISA法检测抗念珠菌Eno特异性抗体,可提高IC的诊断率,具有临床应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王颖	南京大学医学院附属金陵医院南京军区总医院解放军临床检验医学研究所	79	1592	19.0	39.0
2	史利宁	南京大学医学院附属金陵医院南京军区总医院解放军临床检验医学研究所	2	4	2.0	2.0
3	陈笑	南京大学医学院附属金陵医院南京军区总医院解放军临床检验医学研究所	1	2	1.0	1.0
4	黄梅	南京大学医学院附属金陵医院南京军区总医院解放军临床检验医学研究所	1	2	1.0	1.0
5	胡毓安	南京大学医学院附属金陵医院南京军区总医院解放军临床检验医学研究所	1	2	1.0	1.0