分枝杆菌液体培养MALDI-TOF MS快速直接鉴定法的建立与评价

• 作者: 张韶娅 李修远 李雪 杨本善 汤燕燕 王丽赟 王玫 董国伟 黄艳飞
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌 液体培养后直接鉴定 基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 质谱技术的临床应用
• 页码范围: 904-908
• 页数: 5页
• 分类号: R446.5
• 字数: 3618字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2016.12.06

摘要

目的 建立并评价分枝杆菌液体培养基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)直接鉴定技术.方法 收集2014年6月至2016年5月首都医科大学附属北京同仁医院1 466例呼吸科住院患者痰标本,进行BactecTM MGITTM 960分枝杆菌快速液体培养(简称液体培养),以其中报警并经萋-尼抗酸染色确认为抗酸杆菌的105例(无重复病例)为研究对象,对比本实验室自行设计并改良的“同仁”分枝杆菌液体培养直接鉴定法(培养液经特殊前处理后直接进行MALDI-TOF MS鉴定)及传统鉴定法(培养液转种于L-J固体培养基,得到菌落后再进行MALDI-TOF MS鉴定),并通过16S rRNA基因及16S～23S rRNA基因间隔区测序验证.结果 以基因测序鉴定为金标准,液体培养直接鉴定与传统鉴定法结果一致率为100％;二者鉴定至属的准确率均为100％(105/105),鉴定至种的准确率均为99.05％(104/105).液体培养后直接鉴定与传统鉴定法MALDI-TOF MS鉴定分值≥2.000分的比例差异无统计学意义(x2=2.952,P=0.086).4例分值＜1.700分的菌株谱图杂峰较多而有效峰较少.结论 本实验室自行设计的“同仁”分枝杆菌液体培养MALDI-TOF MS直接鉴定法鉴定结果准确,缩短了分枝杆菌培养和鉴定的时间,且可保证生物安全,对分枝杆菌感染的快速诊断和及时治疗意义重大,适用于我国各级临床实验室.