毕赤酵母表达重组牛胰脏羧肽酶A的响应面法优化

• 作者: 徐诗涵 梁志宏 王晓云 黄昆仑
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 牛胰脏羧肽酶A 毕赤酵母 响应面
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 190-197
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.03.030

摘要

采用Central Composite Design（CCD）实验设计及响应面分析相结合的方法，对毕赤酵母表达牛胰脏羧肽酶A的表达条件进行优化，旨在获得牛胰脏羧肽酶A的最佳表达条件。单因素实验结果显示，诱导时间为96 h时，最佳甲醇含量为0.5%、最佳pH值为4、诱导时最佳菌体OD600值为7。在此基础上，利用CCD实验设计及响应面分析法进行回归分析，获得最优表达参数为：甲醇含量0.5%、诱导pH为5.90、接种前种子培养基OD600为6.54。在优化后的条件下进行验证实验，得到牛胰脏羧肽酶A的表达量为0.325 mg/mL，与理论值（0.326 mg/mL）相比，相对误差较小，为0.38%。同时，对表达产物进行了Western Blot鉴定。研究表明，采用响应面法分析优化牛胰脏羧肽酶A的表达条件准确可靠，有助于找出最佳条件，为指导其在发酵罐中进行高密度发酵生产牛胰脏羧肽酶A奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄昆仑	中国农业大学食品科学与营养工程学院	85	903	16.0	26.0
2	梁志宏	中国农业大学食品科学与营养工程学院	39	212	8.0	13.0
3	王晓云	中国农业大学食品科学与营养工程学院	3	5	1.0	2.0
4	徐诗涵	中国农业大学食品科学与营养工程学院	3	10	2.0	3.0