孔雀石绿单克隆抗体制备和酶联免疫检测方法的建立

• 作者: 徐振林 戚平 杨金易 沈玉栋 王宇
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 孔雀石绿 半抗原 单克隆抗体 抗原识别 酶联免疫分析
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 研 究 报 告
• 页码范围: 1385-1393
• 页数: 9页
• 字数: 6069字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.160360

摘要

针对孔雀石绿三苯环特征结构,设计合成1种高质量半抗原。通过偶联载体蛋白、动物免疫和细胞融合,制备出一株高质量的单克隆抗体MG-DA4-C7,亚类为IgG1,轻链为κ型。通过对包被原浓度、抗体浓度、二抗浓度的优化,建立了孔雀石绿间接竞争酶联免疫分析方法。方法半抑制浓度( IC50)为0.96μg/L,线性检测范围(IC20~C80)为0.1~8.1μg/L,LOD(IC10)为0.05μg/L,回归方程y=-0.3274lgx+0.4698(R2=0.9891)。本方法特异性高,与代谢物隐孔雀石绿交叉反应小于0.1％,与结晶紫、灿烂绿交叉反应率分别为18.1％和26.5％；实际样品添加回收率为87.3％~107.3％。本方法测定结果经HPLC-MS/MS方法确证,二者相关系数达0.999。本方法可用于鱼类等水产品中孔雀石绿残留的实际检测。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈玉栋	华南农业大学食品学院	16	62	4.0	7.0
2	徐振林	华南农业大学食品学院	26	209	8.0	14.0
3	王宇		15	47	4.0	6.0
4	戚平		31	107	6.0	8.0
5	杨金易	华南农业大学食品学院	13	147	4.0	12.0