基于酵母表面展示技术的胸苷磷酸化酶全细胞催化剂的构建

• 作者: 余磊 李婕 杨东 王洁 王洪钟
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 胸苷磷酸化酶 全细胞催化 毕赤酵母 表面展示
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 201-206
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.01.032

摘要

胸苷磷酸化酶（TP）在核苷类代谢通路中发挥重要作用，可催化生成多种核苷类似物。构建了 TP 的酵母表面展示系统作为全细胞催化剂。从大肠杆菌 K12菌株中克隆编码 TP 的 deoA 基因，利用酵母表达质粒 pKFS 构建重组质粒，电击转化毕赤酵母 GS115菌株。高拷贝阳性转化子经甲醇诱导96 h 后，免疫荧光结果显示 TP 在酵母细胞表面成功展示。利用β-胸苷为底物，重组酵母细胞作为全细胞催化剂，经 HPLC 检测，结果表明展示在酵母表面的 TP 有催化活性，可以催化β-胸苷生成产物胸腺嘧啶。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洪钟	清华大学生命科学学院	27	137	6.0	11.0
2	李婕	清华大学生命科学学院	4	10	2.0	3.0
3	余磊	清华大学生命科学学院	11	54	5.0	7.0
4	杨东	清华大学生命科学学院	12	92	5.0	9.0
5	王洁	清华大学生命科学学院	2	3	1.0	1.0