大鼠肺微血管内皮细胞的体外分离培养与纯化

• 作者: 冯波 张涛 朱雯宇 梁宏伟 王建舫 穆祥
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大鼠 肺微血管内皮细胞 体外分离培养 免疫磁珠纯化
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 2143-2150
• 页数: 8页
• 分类号: S852.21
• 字数: 6291字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.10.024

摘要

旨在建立一种简单易行、获得细胞纯度较高的体外分离、培养大鼠肺微血管内皮细胞的方法.取5～7日龄SD大鼠分离外周肺组织,组织植块法获得原代大鼠肺微血管内皮细胞,37℃、5％CO2培养箱中传代培养,采用免疫磁珠法对其进行分离纯化,并对分离纯化后的细胞进行免疫荧光及流式细胞鉴定,通过MTT比色分析法准确、安全、可靠地检测纯化后传代肺微血管内皮细胞的增殖情况.结果显示:倒置显微镜下观察单个细胞呈短梭形或多角形,汇合后呈铺路石样,单层贴壁生长,细胞分离纯化后经免疫荧光检测CD31呈阳性,流式细胞仪检测淋巴管内皮细胞表面特有标记VEGFR-3呈阴性(P=0.1,且P＜0.5),且复苏后经MTT测得传代细胞的增殖情况良好.成功建立了一种分离高纯度大鼠肺微血管内皮细胞的体外培养方法.