引入盐桥改善木聚糖酶AoXyn11A的温度特性

• 作者: 吴芹 李闯 王瑞 臧嘉 邬敏辰
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 盐桥 木聚糖酶 温度特性 结构分析 N端空间区域 定点突变
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 69-73
• 页数: 5页
• 字数: 3968字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201607012

摘要

为改善米曲霉(Aspergillus oryzae CICC40186)木聚糖酶AoXyn 11A的温度特性,基于其与同一糖苷水解酶家族耐热木聚糖酶EvXyn11Ts一级和三维结构的比对和分析,在AoXyn11A N端空间区域引入3对盐桥.采用大引物PCR技术对野生型木聚糖酶基因(Aoxyn11A)实施定点突变,构建突变酶AoXyn1 1As基因(Aoxyn1 1As).分别将Aoxyn11A和Aoxyn11As在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中进行表达.酶学性质分析显示:AoXyn1 1As的最适温度(Topt)为58 ℃,较AoXyn1 1A提高了8℃;突变酶在50℃的半衰期(t1/2)为60 min,较原酶延长了1倍多,其在55和60℃完全丧失酶活性的时间分别由原酶的15和4 min延长至35和15 min;而突变酶的pH特性和动力学常数较原酶改变不大.在AoXyn11A N端空间区域引入盐桥增加了其三维结构的刚性,从而明显改善了其温度特性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬敏辰	江南大学无锡医学院	163	1504	22.0	29.0
2	臧嘉	江南大学生物工程学院	4	3	1.0	1.0
3	王瑞	江南大学生物工程学院	18	63	5.0	7.0
4	李闯	江南大学生物工程学院	10	7	2.0	2.0
5	吴芹	江南大学生物工程学院	6	9	2.0	2.0