一种新型火鸡疱疹病毒细菌人工染色体的构建与鉴定

• 作者: 乔永峰 侯继波 刘芳 王志胜 王继春 许梦微
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 火鸡疱疹病毒 细菌人工染色体 糖蛋白C 生长动力学 免疫效力
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 2071-2080
• 页数: 10页
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 7014字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.10.016

摘要

拟构建一种新型火鸡疱疹病毒(HVT)全基因组细菌人工染色体(BAC),通过同源重组方法将mini-F载体插入HVT基因组的糖蛋白C(glycoprotein C,gC)基因的等位位点得到mini-F重组HVT,提取重组病毒的DNA转人大肠杆菌DH10B细胞,再转入GS1783细胞获得BAC,拯救病毒获得mini F重组病毒和gC恢复病毒后,与亲本病毒(HVT FC126)比较生长动力学和对鸡马立克病的免疫效力.结果:获得数个BAC阳性克隆,取其中一个克隆(BACHVT-6)成功拯救出HVT mini-F重组病毒(HVTBAcΔgC),并成功获得了gC恢复毒株(HVTBAC-gC-R).生长特性和免疫效力试验表明HVTBAC-gC-R-R与HVT FC126无显著差异,而HVTBAc-ΔgC增殖能力和免疫效力均明显下降.成功构建了HVT全基因组的感染性BAC;HVT的gC基因是一个非必需基因,但对病毒的增殖能力和免疫效力有重要影响.