超顺磁性氧化铁和绿色荧光蛋白双标骨髓间充质干细胞体外诱导类神经元样分化的生物学活性及MRI研究

• 作者: 何波 刘流 吴莉 赵卫 赵娴 陆琳 陈泽谷
• 来源期刊: 中华放射学杂志
• 关键词: 充质干细胞 磁共振成像 分子探针
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 217-222
• 页数: 6页
• 字数: 5436字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1201.2016.03.013

摘要

目的：探讨超顺磁性氧化铁(SPIO)及绿色荧光蛋白(GFP)双标的骨髓间充质干细胞（BMSCs）向类神经元样分化的生物学活性及MRI信号强度(SI)变化特点。方法将GFP-BMSCs体外标记不同浓度SPIO(A~D组铁浓度分别为25、50、75、100μg/ml, E组未标SPIO为对照组)，普鲁士蓝染色检测各组SPIO标记率，原子分光光度计测量铁含量，CCK8实验检测细胞增殖率，PCR检测细胞周期；A~E组均将1×108个细胞置试管内行MR T2*WI、磁敏感加权成像（SWI），测量2个序列图像SI变化并进行比较，找出最佳成像浓度组与E组共同诱导类神经元样分化，72 h行茜素红、骨钙素及尼氏、神经元特异性核蛋白（NeuN）染色、神经丝蛋白200染色，实时定量PCR检测β-Ⅲ微管蛋白(tub3)、巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋白2（MAP-2)、突触结合蛋白(Syt1)RNA表达量，比较两组细胞染色阳性率及RNA表达量，最终采用SWI分析SI差异。多组间比较用单因素方差分析，多组间两两比较用LSD-t检验；两组均数比较采用独立样本t检验。结果 A~D组SPIO标记率为100%，A~E组细胞内铁含量分别为(14.36±7.61)、(21.73±3.42)、(30.54±8.73)、(33.65±9.62)、(2.31±0.32) pg/cell，A~D组均较E组高(F=3.852，P=0.003)，C组与D组间差异无统计学意义(P=0.267)；CCK8实验A值D组最小(3.18±0.46)；A~E组SI变化SWI序列均较T2*WI序列低，差异均有统计学意义。SWI序列SI变化C组（145.89±14.31）与D组（127.37±12.21）差异无统计学意义(P=0.064)，其余各组两两比较差异均有统计学意义(P值均<0.01)。C组SWI和T2*WI SI衰减百分率分别为48.15%、69.34%。C、E 2组诱导向类神经元样分化，非神经元细胞比例、尼氏染色细胞阳性率比较差异均无统计学意义(P值均>0.05)。tub3、Nestin、NSE均较未诱导分化前表达量明显增高(P值均<0.01)，C组诱导分化前、后SWI序列成像SI差异无统计学意义(t=1.26, P=0.236)。结论 SPIO、GFP双标未影响BMSCs的生物学活性，可诱导分化为类神经元样细胞，且随着细胞内SPIO浓度的升高MR信号降低，SWI序列最敏感，诱导前后SWI信号强度未见变化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何波	昆明医科大学第一附属医院医学影像科	62	148	7.0	9.0
2	陆琳	昆明医科大学第一附属医院医学影像科	12	46	4.0	6.0
3	赵卫	昆明医科大学第一附属医院医学影像科	207	1133	17.0	25.0
4	吴莉	昆明医科大学第一附属医院医学影像科	22	126	5.0	11.0
5	刘流	昆明医科大学第一附属医院整形外科	21	52	4.0	5.0
6	赵娴	昆明医科大学第一附属医院整形外科	17	40	4.0	5.0
7	陈泽谷	中南大学湘雅医学院附属海口医院放射科	8	60	4.0	7.0