Clostridium clariflavum DSM19732木聚糖酶Xyn2441的克隆表达及条件优化

• 作者: 余嘉慧 唐蕾 张庆华 毛忠贵 胡方觊
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: Clostridium clariflavum DSM 19732 木聚糖酶 Clocl-2441 克隆表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 16-22
• 页数: 7页
• 字数: 3912字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201607003

摘要

Clostridium clariflavum DSM 19732是一种颇具应用价值的木质纤维素降解菌,尤其对半纤维素的降解能力非常高,国外学者已开始关注其中木质纤维素降解酶类的结构与功能,国内尚无相关报道.作者首次从复合菌系RXS基因组DNA中扩增出C.clariflavum DSM 19732的一个表达双功能木聚糖酶(糖苷水解酶家族(glycosyl hydrolase family,GH)10和11的木聚糖酶)的基因Clocl-2441,并将其与载体pET28a(+)连接,在大肠杆菌E.coii BL21(DE3)成功表达.重组菌最佳诱导表达条件为:添加诱导剂时的菌体量OD600值约为1.25、诱导剂IPTG浓度为0.5 mmol/L、诱导时间7～8h及诱导温度25℃,此时胞内重组酶比酶活达到34.92 U/mg.经镍柱初步分离纯化后比酶活达713.16 U/mg,纯化倍数20.83倍,回收率27％.重组酶的最适反应温度和pH分别为70℃和6.5.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛忠贵	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	175	1381	18.0	29.0
2	唐蕾	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	43	191	8.0	11.0
3	张庆华	江西农业大学生物科学与工程学院	21	76	5.0	7.0
4	胡方觊	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	3	6	2.0	2.0
5	余嘉慧	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	1	3	1.0	1.0