一种密码子优化的酸性普鲁兰酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达

• 作者: 李琛 樊游 沈微 王兵波 罗枭 钱灵紫 陈献忠
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 酸性普鲁兰酶 密码子优化 巴斯德毕赤酵母 高密度发酵
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-15
• 页数: 7页
• 字数: 5882字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201607002

摘要

根据毕赤酵母密码子偏好性对来源于Bacillus deramificans的普鲁兰酶基因进行优化并构建在细胞内表达普鲁兰酶的重组毕赤酵母.优化后普鲁兰酶编码基因BdP4在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达水平平均比优化前的普鲁兰酶基因BdP提高4倍以上.筛选到1株表达水平较高的重组菌Pichia pastoris GS115/pPIC9K-BdP4 WB54.在5L发酵罐获得了初步优化的发酵条件:发酵液pH4.5,在菌体量达到87 g/L时开始甲醇流加,采用溶氧(D0)恒定策略控制甲醇流加,DO控制在25％的水平,甲醇流加速率为9.9 mL/(L· h),搅拌转速控制在最大值800 r/min,通风量2 V/(v·m).在优化条件下重组菌发酵酶活在2 000 U/mL以上.重组酶最适pH为4.0,最适作用温度50℃,在50和55℃下酶活半衰期分别为32和18h.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈献忠	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	33	205	8.0	13.0
2	王兵波	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	1	4	1.0	1.0
3	钱灵紫	江南大学工业生物技术教育部重点实验室	1	4	1.0	1.0
4	李琛	苏州欧福蛋业有限公司研发部	1	4	1.0	1.0
5	罗枭	帝斯曼(中国)有限公司亲水胶体事业部	1	4	1.0	1.0