白花蛇舌草提取物对表皮生长因子诱导的HaCaT细胞增殖、凋亡和TNF-α诱导的炎症因子影响

• 作者: 付丹丹 刘冬 夏永华 宋向凤 李占国 李敏 田中伟
• 来源期刊: 中国中西医结合杂志
• 关键词: 白花蛇舌草提取物 人永生化表皮细胞 增殖 凋亡 炎性因子
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 975-980
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7661/CJIM.2016.08.0975

摘要

目的 观察白花蛇舌草提取物(Hedyotis diffusa extract,HDE)对HaCaT细胞增殖、凋亡和炎症因子的影响,并探究可能的分子机理.方法 实验分为3组:空白组不加表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和HDE处理,对照组只加EGF而不加HDE处理,白花蛇舌草组分别用25、50、100 mg/mL HDE和EGF共培养.CCK-8法检测HaCaT细胞增殖情况,流式细胞仪检测HaCaT细胞生长周期和凋亡率,Western blot法测定Ki67、Bcl-xL、clAP1、procaspase-3、cleaved caspase-3的蛋白表达,ELISA法检测HaCaT细胞培养基上清液中IL-6、IL-8、IL-10的浓度,Western blot检测NF-κB p65亚基磷酸化(p-p65)水平.结果 与空白组比较,对照组HaCaT细胞吸光度及Ki67蛋白表达升高(P ＜0.05,P＜0.01),p-p65、IL-6、IL-8水平升高(P ＜0.05,P＜0.01),IL-10水平降低(P＜0.01);与对照组比较,白花舌草组25、50、100 mg/mL浓度时HaCaT细胞吸光度及Ki67蛋白表达降低(P ＜0.05,P＜0.01),p-p65、IL-6、IL-8水平降低,IL-10水平升高(P ＜0.05,P＜0.01);同时白花蛇舌草组各浓度组凋亡率较对照组增加(P ＜0.05,P＜0.01).对照组处于G1期的细胞数量百分比为52.85％,白花蛇舌草组25、50、100 mg/mL浓度时分别是58.51％、73.12％和79.95％,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).与白花蛇舌草组25 mg/mL比较,白花蛇舌草组50和100 mg/mL处于G1期的细胞数量百分比及凋亡率升高(P＜0.01),且白花蛇舌草组100 mg/mL时处于G1期的细胞数量百分比及凋亡率高于白花蛇舌草组50 mg/mL(P＜0.05).与对照组比较,白花蛇舌草组100 mg/mL时Bcl-xL和clAP1蛋白表达降低(P ＜0.01,);caspase-3总量变化差异无统计学意义(P＞0.05),cleaved caspase-3表达升高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 HDE可能通过将HaCaT细胞阻滞在G1期而抑制其增殖,通过抑制Bcl-xL和clAP1蛋白表达、提高cleaved caspase-3蛋白表达而促进HaCaT细胞凋亡,通过调控NF-κB而抑制HaCaT细胞炎症反应.