重组融合蛋白Trx-IFN-CSP复性工艺研究

• 作者: 卢雪梅 朱家勇 杨小蓉 金小宝 黄演婷
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 融合蛋白 肝靶向干扰素 包涵体 脉冲稀释 梯度透析
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 219-225
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.06.032

摘要

旨在建立并优化融合蛋白Trx-IFN-CSP的复性工艺。对重组融合Trx-IFN-CSP进行体外复性研究，考查pH、温度、蛋白浓度、氧化还原体系及辅助复性小分子等复性条件对融合蛋白重折叠的影响。结果显示，适合Trx-IFN-CSP复性的方法为，反复冻融联合超声破菌获得包涵体；用含有1%TritonX-100、2mol/L尿素、2%DOC洗涤液初步纯化包涵体；再用6mol/L盐酸胍溶解液变性包涵体；脉冲加样稀释变性液后4℃条件下梯度透析复性，使用L-Arg辅助复性。经肠激酶切去Trx标签后，每升发酵液最终获得110-130mg肝靶向干扰素，每批蛋白纯度都在95%以上，比活性在1.9-2.4×108U/mg之间，制备工艺稳定。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金小宝	广东药学院基础学院药用生物活性物质研究所	100	490	12.0	15.0
5	黄演婷		11	22	4.0	4.0
11	卢雪梅	广东药学院基础学院药用生物活性物质研究所	18	31	4.0	4.0
15	杨小蓉		21	74	5.0	7.0