双功能试剂与螯合金属元素标记多肽新技术的建立

• 作者: 丁慧荣 张宏 徐庆春 朱华 沈靖 王昕 田志华 田慧芳
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 双功能试剂 标记 多肽 蛋白定量 质谱
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1022-1028
• 页数: 7页
• 字数: 4571字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.150615

摘要

建立了双功能试剂2-[(4-异硫氰基苯基)甲基]-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸(p-SCN-Bn-DOTA)与标准肽段反应的新方法,测定了反应产物与镧系金属Eu(Ⅲ)的螯合效率,探索了其作为靶向探针和蛋白定量标记试剂性能.考察了不同缓冲体系的浓度及pH值、p-SCN-Bn-DOTA量与肽段相对量、反应体系中有机相与水相比例,反应温度与反应时间对偶联效率的影响.实验结果显示:p-SCN-Bn-DOTA量为肽段的32倍,缓冲体系为0.2 mol/L TEAB(pH 8.5),60℃反应60 min,有机相与水相之比为4.4∶1 (V/V)时标记效率高;在HCI/NaAc缓冲体系(pH 4.0)中60℃反应60 min,金属离子鳌合反应效率高达94％.本研究建立了一种新的基于双功能试剂p-SCN-Bn-DOTA的标记方法,并成功用于RGD肽等的标记.