大豆巯基肽的共价色谱法制备及其MALDI-TOF-MS分析

• 作者: 丁秀臻 华欲飞 孔祥珍 张彩猛 陈业明
• 来源期刊: 中国油脂
• 关键词: 大豆球蛋白酶解物 巯基肽 还原 Thiolpropyl-Sepharose 6B MALDI-TOF-MS
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 油料蛋白
• 页码范围: 31-36
• 页数: 6页
• 分类号: TS229|TQ937
• 语种: 中文

摘要

建立了一种从复杂的大豆球蛋白酶解物中提取巯基肽的高选择性方法.首先,对大豆球蛋白酶解物中的二硫键用1,4-二硫苏糖醇进行还原,对还原剂的用量进行了考察和优化,提高了酶解物中的巯基肽含量.然后用Thiopropyl-Sephrose 6B共价色谱制备还原酶解物中的巯基肽,对共价色谱的吸附、解吸条件进行了考察和优化.研究表明:二硫键还原最佳1,4-二硫苏糖醇用量为20 mmol/L,还原之后酶解物中的巯基含量从1.8 μmol/g提高到了113.8 μmol/g.共价色谱的最佳条件为还原酶解物的上样量为酶解物中巯基含量占凝胶活性位点的80％,键合时间30 min;解吸时1,4-二硫苏糖醇浓度20 mmol/L,解吸时间20 min.此外,C18柱可以有效地将巯基肽中的1,4-二硫苏糖醇和2-巯基吡啶去除.MALDI-TOF-MS分析表明制备的巯基肽中可检测到45个肽段,其中36个肽段含有巯基,表明Thiolpropyl-Sepharose 6B共价色谱对巯基肽有很高的选择性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	华欲飞	江南大学食品学院食品科学与工程国家重点实验室	163	1602	20.0	32.0
2	孔祥珍	江南大学食品学院食品科学与工程国家重点实验室	77	497	12.0	19.0
3	张彩猛	江南大学食品学院食品科学与工程国家重点实验室	39	132	8.0	9.0
4	陈业明	江南大学食品学院食品科学与工程国家重点实验室	32	61	4.0	6.0
5	丁秀臻	江南大学食品学院食品科学与工程国家重点实验室	7	13	2.0	3.0