毕赤酵母 Kar2p 过表达对假黑盘菌素表达量的影响

• 作者: 刘德虎 李刚强 王楠 郭文芳
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: Kar2p 假黑盘菌素 毕赤酵母 二次转化 重组表达
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 180-186
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.01.001

摘要

Kar2p 是一种分子伴侣蛋白，为研究其对外源蛋白在毕赤酵母中表达的影响，从毕赤酵母菌株 GS115中克隆出编码该蛋白的基因，利用其对毕赤酵母转化子 P-Ple 进行二次转化，获得了能够同时过表达假黑盘菌素和 Kar2p 的二次转化子 P-PleKar；采用荧光定量 PCR 方法，对 P-Ple 和 P-PleKar 两个转化子中的 Kar2p 转录水平进行了测定发现，在 P-PleKar 中 Kar2p 的转录水平比 P-Ple 上调了约18倍。对 P-Ple 和 P-PleKar 两个转化子的生长曲线进行比较，发现 Kar2p 过表达对宿主细胞的生长无明显影响，但对外源蛋白假黑盘菌素的表达确实产生了一定的抑制作用，受 Kar2p 的影响，在诱导培养48 h 时，假黑盘菌素的最高抑菌活性明显降低。这种抑制表达不单针对假黑盘菌素，对毕赤酵母的蛋白酶表达和分泌也同样起到了一定的抑制作用，具体表现在分泌到培养液中的假黑盘菌素在发酵后期仍然能保持较高抑菌活性，没有被发酵液中的累积的蛋白酶快速降解。与 P-Ple 相比，P-PleKar假黑盘菌素的表达量虽略有降低，但可以维持更长时间的稳定表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王楠	中国农业科学院生物技术研究所	27	138	8.0	10.0
2	李刚强	中国农业科学院生物技术研究所	16	78	6.0	8.0
3	刘德虎	中国农业科学院生物技术研究所	24	218	9.0	14.0
4	郭文芳	中国农业科学院生物技术研究所	5	31	3.0	5.0