抑制SHARPIN激活Rip1促进LNCaP－AI细胞坏死性凋亡

• 作者: 余永晟 张一鸣 曹亿 曾乐祥 林春浩 王淦平 赖义明 郭正辉 陈贤举 黄海
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 去势抵抗性前列腺癌 LNCaP-AI细胞 Rip1 SHARPIN 坏死性凋亡
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: ? 论 著?
• 页码范围: 1214-1220
• 页数: 7页
• 分类号: R363.2
• 字数: 4689字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2016.07.010

摘要

目的：探讨SHARPIN对去势抵抗性前列腺癌细胞LNCaP－AI坏死性凋亡关键因子Rip1的调控作用，以及对细胞坏死性凋亡的影响。方法：将LNCaP－AI细胞分为TNF－α＋Z－VAD（ caspase抑制剂）处理组与TNF－α＋Z－VAD＋Nec－1（Rip1抑制剂）处理组，应用MTS检测各组细胞的活力，研究坏死性凋亡机制在诱导LNCaP－AI细胞死亡中的作用。将LNCaP－AI细胞分为阴性对照组和SHARPIN干扰（ si－SHARPIN）组，RT－qPCR验证抑制效率，通过免疫荧光等技术进一步探讨SHARPIN调控坏死性凋亡的具体分子机制。结果：与对照组相比，TNF－α＋Z－VAD处理组的LNCaP－AI细胞活力下降28％（P＜0．05），而TNF－α＋Z－VAD ＋Nec－1处理组的细胞在Rip1被抑制后，细胞活力无明显改变。在LNCaP－AI细胞中，通过siRNA抑制SHARPIN表达后，Rip1表达水平上调，同时， LNCaP－AI细胞坏死性凋亡比例升高。结论：LNCaP－AI细胞可通过坏死性凋亡机制诱导死亡，下调SHARPIN可能通过激活Rip1增强LNCaP－AI细胞坏死性凋亡。