致倦库蚊天蚕素 CecB2基因的原核表达及蛋白纯化

• 作者: 张堤 张春林 张晶 王吉平 翟素珍 赵文静
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 致倦库蚊 天蚕素基因 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 31-35
• 页数: 5页
• 分类号: S859.799.9|S881.3
• 字数: 4339字
• 语种: 中文

摘要

构建致倦库蚊（贵阳株）天蚕素 B2（CecB2）基因原核表达载体，并原核表达获得重组蛋白。定向克隆 CecB2成熟肽序列至原核表达载体 pET32a（＋）上，将成功构建的 pET32a-CecB2重组表达质粒转化大肠埃希菌 Rosetta 中经 IPTG 诱导表达，对 IPTG 诱导浓度和诱导时间优化后表达所得目的蛋白采用镍离子亲和层析纯化，SDS-PAGE 和 Western blot 检测鉴定表达蛋白。结果表明，成功构建原核表达载体pET32a-CecB2，IPTG 浓度和时间优化结果为 IPTG 浓度为0．05 mmol／L，诱导时间为3 h。SDS-PAGE 检测获得大小约25 ku 的可溶性纯化蛋白，Western blot 鉴定纯化蛋白可与鼠抗 His-tag 单克隆抗体发生抗原抗体结合反应。说明所构建原核表达载体 pET32a-CecB2能在大肠埃希菌中可溶表达，为进一步研究其生物学功能奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵文静	贵州医科大学生物学教研室	9	8	2.0	2.0
2	张晶	贵州医科大学生物学教研室	7	4	1.0	2.0
3	翟素珍	贵州医科大学生物学教研室	11	10	2.0	3.0
4	张春林	贵州医科大学生物学教研室	16	20	3.0	4.0
5	王吉平	贵州医科大学生物学教研室	5	1	1.0	1.0
6	张堤	贵州医科大学生物学教研室	2	0	0.0	0.0