两阶段温度控制策略以及助剂促进淀粉分支酶的胞外表达

• 作者: 李兆丰 李才明 李柱 洪雁 王驰 程力 顾正彪
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 淀粉分支酶 胞外表达 两阶段温度控制策略 发酵优化
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 19-24
• 页数: 6页
• 字数: 3825字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201608004

摘要

为了促进重组淀粉分支酶在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis WB600)中的胞外表达,对重组淀粉分支酶在摇瓶水平上进行了发酵优化.首先,以胞外酶活力为指标,先后考察了初始培养基、pH、培养温度和培养时间4种因素对胞外表达的影响;然后,通过两阶段温度策略和助剂的添加进一步提高胞外表达水平.结果表明,当发酵培养基为TB、pH为7.5时,25℃培养24 h后胞外酶活力达到19.9 U/mL;同时,菌体生长最适温度和酶分泌的最适温度是不一致的,通过两阶段温度控制策略(即0～12h控制温度30℃,12 h后温度调至25℃),胞外酶活力与单一温度条件下的最高水平(25℃)相比提高了1.4倍,达到了47.1 U/mL;在此基础上,进一步添加0.05％的吐温-80,将胞外酶活进一步提高40％,达到65.8 U/mL.