蒺藜苜蓿E3泛素连接酶U-box基因克隆及表达分析

• 作者: 李聪 邵麟惠 郑兴卫
• 来源期刊: 草业学报
• 关键词: 蒺藜苜蓿 E3泛素连接酶 U-box 基因克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 62-72
• 页数: 11页
• 字数: 7899字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11686/cyxb2016073

摘要

泛素化在植物生长和发育过程中起重要作用,E3泛素连接酶负责对靶蛋白特异性识别,其中U-box结构的E3泛素连接酶具有调控植物生长发育和免疫反应等功能,并在抗逆性方面发挥作用.目前,关于蒺藜苜蓿U-box家族基因的研究尚未见报道.本研究从蒺藜苜蓿中克隆得到U-box (MtPUB4)基因,该基因cDNA全长2448 bp,编码815个氨基酸,包括1个U-box结构(C-X2-H-X7-C-X7-C-X2-C-H-X2-H)和5个ARM结构域,属于U-box/ARM类型E3泛素连接酶.构建原核表达载体pET-MtPUB4,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)表明在大肠杆菌中表达了MtPUB4蛋白.荧光定量PCR分析表明MtPUB4基因在蒺藜苜蓿花中的表达量最高,在根中表达量最低.MtPUB4基因受到NaCl、聚乙二醇、脱落酸诱导,随着诱导时间增加,表达量呈现出增长趋势.这些结果表明,MtP UB4基因在蒺藜苜蓿生长发育和抗逆性中可能起到重要调节作用,但在低温胁迫中表达量稍微下降,变化不明显.本研究成功构建了pBI121-MtPUB4植物表达载体,为进一步转化拟南芥突变体Atpub4奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李聪	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	45	378	11.0	17.0
2	邵麟惠	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	6	24	3.0	4.0
3	郑兴卫	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	6	28	3.0	5.0