橡胶树HAD家族蛋白酸性磷酸化酶基因VSP2的表达分析

• 作者: 李博勋 田维敏 陈奕鹏 陈珊 黄贵修
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 橡胶树 HbVSP2基因 克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 1107-1114
• 页数: 8页
• 分类号: S794.1
• 字数: 4915字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2016.06.010

摘要

植物营养储藏蛋白VSP2是HAD家族蛋白(haloalcanoic acid dehalogenase super family,HAD)的主要成员之一.该蛋白具有酸性磷酸化酶的功能,在橡胶树氮素储存和植物凝集素防御胁迫中发挥着重要的作用.在前期研究中,利用cDNA-AFLP获得了1条与橡胶树棒孢霉落叶病抗病性相关的差异表达片段EST-IAN-24,通过Blast比对分析,发现该基因片段与其他物种的VSP2基因具有较高同源性.采用PCR和RT-PCR技术,克隆获得了一个橡胶树 VSP2基因的cDNA和基因组序列,并将该基因命名为HbVSP2.基因序列分析显示,该基因编码区全长(CDS)975 bp,含有4个内含子和5个外显子,编码324个氨基酸,推测该蛋白的分子质量为30.01 ku,等电点为4.80.该基因蛋白是HAD家族蛋白中的酸性磷酸酶,具有DXDXT基序特征.qRT-PCR定量分析发现,受多主棒孢病菌侵染后,HbVSP2基因在橡胶树抗、感品种中的表达量存在着明显的差异,抗病品种(IAN873)的表达量显著高于感病品种(PR107),且在接种12h达到了峰值;此外,该基因在水杨酸、茉莉酸甲酯、乙烯的处理下均能诱导其表达,对茉莉酸甲酯的敏感性明显高于其他2个激素.本研究初步表明,HbVSP2基因可能参与橡胶树与多主棒孢病菌的互作并且与抗病性相关.