PDX-1基因克隆载体的体外构建

• 作者: 汪珊珊 陈明卫
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 胰-十二指肠同源框-1 cDNA 胰岛细胞瘤 克隆载体
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 31-33
• 页数: 3页
• 分类号: R587
• 字数: 2871字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2016.04.010

摘要

目的：体外构建胰-十二指肠同源框-1( PDX-1)基因的克隆载体。方法采用TRIzol方法从大鼠胰岛细胞瘤细胞株中提取RNA,通过RT-PCR方法在体外扩增大鼠PDX-1 cDNA,琼脂糖凝胶电泳鉴定,割胶纯化后回收目的基因,与pMD-18T克隆载体连接构建,经限制性内切酶双酶切及DNA序列分析鉴定pMD-18T-PDX-1的正确构建。结果正确构建了含有PDX-1 cDNA的克隆载体pMD-18T-PDX-1,其中PDX-1 cDNA全长为908 bp。将经双酶切鉴定正确的pMD-18T-PDX-1细菌克隆进行测序,测定结果与GenBank中大鼠PDX-1基因序列(NM_022852.3)一致。结论成功构建了PDX-1基因克隆载体。该载体可为PDX-1基因分子生物学研究及PDX-1基因在诱导非β细胞向胰岛素分泌细胞分化中作用机制的研究提供基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈明卫	安徽医科大学第一附属医院	114	551	12.0	18.0
2	汪珊珊		5	21	3.0	4.0