TLR4信号通路在高糖诱导骨髓来源巨噬细胞激活中的作用

• 作者: 吴永贵 张婷敏 徐兴欣 王坤 邵云侠
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓来源巨噬细胞 Toll受体4 高糖 炎症
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1396-1402
• 页数: 7页
• 分类号: R587.24
• 字数: 5375字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.10.002

摘要

目的 通过研究高糖对骨髓来源巨噬细胞(BMDM)Toll受体4(TLR4)表达及其下游信号通路的影响,初步探讨高糖通过TLR4信号通路促进巨噬细胞分泌炎症因子的机制.方法 分离获取C57BL/6J及B10ScNNju(TLR4基因敲除小鼠)BMDM,流式细胞仪检测其纯度;选取不同浓度的高糖及甘露醇,在不同时间点刺激BMDM;后将BMDM分为4组:正常糖浓度(LG)组、高糖刺激(HG)组、TLR4基因敲除(TLR4-/-)组、TLR4基因敲除BMDM高糖刺激(TLR4-/-+HG)组.采用流式细胞术观察BMDM M1表型,细胞免疫荧光法观察BMDM TLR4与诱生型一氧化氮合酶(iNOS)共表达,实时定量PCR法检测各组细胞中促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、白细胞介素1β(IL-1β)及iNOS的mRNA表达,Westem blot法检测各组总蛋白中TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、TIR结构域衔接蛋白(Trif)、磷酸化白介素受体相关激酶-1(p-IRAK-1)、干扰素调节因子3(IRF3)、磷酸化(p)-IRF3、核因子κB(NF-κB) p65、NF-κB p-p65、iNOS蛋白的表达,ELISA法测定细胞上清液中促炎因子TNF-α、MCP-1、IL-1β的表达.结果 与LG组比较,高糖可使M1型巨噬细胞百分比增加;TNF-α、MCP-1、IL-1β及iNOS的mRNA水平上调;TLR4、MyD88、Trif、p-IRAK-1、p-IRF3、IRF3、NF-κB p65、NF-κB p-p65、iNOS蛋白表达水平升高;细胞培养基中分泌的TNF-α、MCP-1、IL-1β水平升高.TLR4基因敲除可消除高糖导致的巨噬细胞激活效应.结论 高糖可诱导BMDM向M1型极化;TLR4基因敲除可抑制高糖诱导的巨噬细胞向M1活化及炎症因子的产生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴永贵	安徽医科大学第一附属医院肾脏内科	135	874	15.0	22.0
2	王坤	安徽医科大学第一附属医院肾脏内科	36	177	8.0	11.0
3	徐兴欣	安徽医科大学第一附属医院肾脏内科	15	88	6.0	8.0
4	邵云侠	安徽医科大学第一附属医院肾脏内科	10	45	4.0	5.0
5	张婷敏	安徽医科大学第一附属医院肾脏内科	1	3	1.0	1.0