HBV感染患者外周血单个核细胞HBV DNA和cccDNA的检测

• 作者: 刘畅 刘鸿博 吴贻琛 姜棋予 徐元勇 李浩 王志杰 邸凤林 钟彦伟
• 来源期刊: 中华疾病控制杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,乙型 DNA 原位标记
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 888-892
• 分类号: R373.21|R181.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16462/j.cnki.zhjbkz.2016.09.007

摘要

目的 探讨乙型肝炎患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)能否感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)并进行复制.方法 选取137例住院患者作为研究对象,采集血液标本,分离提取外周血单个核细胞,使用细胞甩片法固定细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术(real-time quantitative pol-ymerase chain reaction,QPCR)和滚环扩增结合原位跨缺口原位聚合酶链式反应技术检测HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA);免疫组织化学染色法检测HBV DNA和HBV cccDNA表达.结果 137例标本中,68.6％ (94/137)的标本经免疫组化染色后检测出HBV DNA的表达;83.9％ (115/137)的标本原位杂交和滚环扩增PCR后检出HBV cccDNA阳性信号;血清HBV DNA浓度高于106 copies/ml的患者PBMC中HBV cccD-NA阳性率为95.1％,低于106 copies/ml的阳性率为51.4％.结论 高浓度外周血HBV DNA是HBV感染外周血单个核细胞的危险因素,通过原位聚合酶链式反应方法能够更灵敏地检测HBV DNA和cccDNA在PBMC中的表达,为进一步研究证实PBMC感染导致HBV母婴传播途径的分子机制奠定基础.