pSUPER-IL-11-shRNA表达载体的构建与鉴定

• 作者: 储红映 孙传政 王伟 程瑞 胡泽东 钟兆铭 陈雪
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 甲状腺肿瘤 白细胞介素-11 RNA,小分子干扰 短发夹RNA 质粒
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1269-1273
• 页数: 5页
• 分类号: R34-33|R736.1
• 字数: 3025字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2016.11.007

摘要

目的：构建及测序鉴定重组质粒pSUPER-IL-11-shRNA，检测其对甲状腺未分化癌（ anaplastic thyroid carcinoma，ATC）细胞株sw579 IL-11基因的沉默效应。方法：根据Genebank中IL-11 cDNA序列，设计并合成3对两端有酶切位点的特异编码IL-11shRNA序列的寡核苷酸链，退火成互补双链后与pSUPER. retro. puro质粒载体连接，转至大肠杆菌DH-5α菌株，挑取单个抗性克隆，提取质粒进行1%琼脂糖凝胶电泳鉴定及测序分析，脂质体介导重组质粒转染ATC细胞株sw579，real-time PCR及ELISA检测其对靶基因IL-11的表达影响。结果：重组质粒pSUPER-IL-11-shRNA酶切产物凝胶电泳结果显示，3个样本均为阳性重组质粒，测序鉴定3种重组质粒pSUPER -IL-11-shRNA序列正确，转染3种重组质粒后sw579细胞裂解液中IL-11 mRNA和细胞培养上清液中IL-11蛋白显著降低。结论：本研究成功构建重组质粒pSUPER-IL-11-shRNA，为进一步探索IL-11在ATC进展中的作用奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟	昆明医科大学第三附属医院头颈外科	17	22	3.0	4.0
2	孙传政	昆明医科大学第三附属医院头颈外科	11	13	2.0	3.0
3	钟兆铭	昆明医科大学第三附属医院头颈外科	6	3	1.0	1.0
4	陈雪	昆明医科大学第三附属医院头颈外科	2	0	0.0	0.0
5	储红映	昆明医科大学第三附属医院头颈外科	1	0	0.0	0.0
6	胡泽东	昆明医科大学第三附属医院头颈外科	2	2	1.0	1.0
7	程瑞	昆明医科大学第三附属医院头颈外科	3	1	1.0	1.0