磷脂酰肌醇蛋白聚糖3真核表达载体的构建及在细胞中的表达

• 作者: 吴萌 崔硕 张昭军 方向东 李泽夏 程华
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 真核表达 脂质体转染 亲和纯化
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 146-150
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.05.019

摘要

构建载体表达人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican-3，GPC3）蛋白，用以获得抗GPC3单克隆抗体。用PCR技术扩增GPC3基因，利用酶切位点将该序列插入p3XFLAG-CMV-14载体，构建pCMV-gpc3表达载体。通过脂质体将该载体转染至HEK293细胞中，利用Western blot技术检测最终结果。收集稳定表达的细胞，破碎，通过亲和层析柱，获得纯度较高的GPC3蛋白。成功构建pCMV-gpc3真核表达载体，转染至HEK293细胞后，经G418筛选获得稳定表达的单克隆细胞系；Western blot分析结果表明目的蛋白高效表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴萌	河北省科学院生物研究所	32	79	5.0	7.0
2	方向东	中国科学院北京基因组研究所	27	152	8.0	11.0
3	程华	河北省科学院生物研究所	13	38	3.0	5.0
4	崔硕	河北省科学院生物研究所	4	2	1.0	1.0
5	张昭军	中国科学院北京基因组研究所	6	29	2.0	5.0
6	李泽夏	中国科学院北京基因组研究所	1	0	0.0	0.0