三疣梭子蟹Spook基因克隆及其表达分析

• 作者: 周彦琦 朱冬发
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 三疣梭子蟹 Spook 蜕皮周期 基因克隆 表达水平
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 131-139
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.05.017

摘要

甲壳动物蜕皮激素（Ecdysteroids）主要在Y器官（YO）中合成与分泌，参与调控蜕皮、繁殖等多项生理活动。Spook基因编码的细胞色素P450（CYP）307a1是蜕皮激素合成通路早期的关键酶。为了研究其在三疣梭子蟹蜕皮过程中的调控作用，采用反转录PCR（RT-PCR）和cDNA末端快速扩增（RACE）技术，克隆得到了三疣梭子蟹Spook基因的全长cDNA序列（Gen- Bank登录号：KM030021）。该序列全长为2200 bp，包含一个长度为1563 bp的开放阅读框，编码520个氨基酸；比对分析显示该氨基酸序列含helix-C、helix-K、helix-I、PERF、heme-binding 5个P450特征保守区域；系统进化树分析发现推导的三疣梭子蟹Spook蛋白与其他物种Spook聚为一支，而其他Halloween基因则分别聚为一支，表明推导的氨基酸确实是三疣梭子蟹Spook的蛋白序列。采用实时荧光定量PCR（qPCR）技术分析了其在不同组织中的表达情况，结果显示Spook基因主要在三疣梭子蟹的YO中表达。在三疣梭子蟹的蜕皮周期中，Spook基因的表达水平自蜕皮后期（A、B期）逐渐上升，并在蜕皮间期（C期）上升至最大，随后在蜕皮前期逐渐下降至D3、D4亚期最低。研究结果表明Spook基因可能参与调控三疣梭子蟹的蜕皮过程。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱冬发	宁波大学海洋学院	39	525	15.0	22.0
2	周彦琦	宁波大学海洋学院	7	27	3.0	4.0