组成型表达绿色荧光蛋白的重组干酪乳杆菌的构建

• 作者: 乔薪瑗 姜艳平 崔文 徐义刚 王丽 谭飞 邵怡岚 郭超群 陈佩佩
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 增强型绿色荧光蛋白 干酪乳杆菌 组成型表达
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 22-26
• 页数: 5页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3316字
• 语种: 中文

摘要

以干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)组成型表达质粒pPG-T7g10-PPαT为重组载体,在限制性内切酶SacⅠ和ApaⅠ酶切位点之间,插入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,构建重组质粒pPG-T7g1 0-EGFP,电转化干酪乳杆菌ATCC393(L.casei 393),获得重组菌pPG-T7g10-EGFP/L.casei 393;利用Western blot检测可见约27 ku的重组蛋白特异性反应带;激光共聚焦显微镜下可见重组菌出现特异的绿色荧光;流式细胞术分析可见重组菌出现了明显的荧光信号.结果表明:已经获得组成型表达EGFP的重组干酪乳杆菌.本研究为进一步利用该表达系统表达功能蛋白,拓展乳酸菌的应用提供了参考.