枝干树皮宏基因组 DNA 的提取

• 作者: 李燕芳 范东颖 赵玲云 颜霞 黄丽丽
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 枝干树皮 DNA 提取 KAc RNase A 高通量测序
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 74-79
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.01.018

摘要

旨在得到一种适用于提取多种枝干树皮的高质量 DNA 的方法。参考前人提取植物 DNA 的经验，综合了研磨时加 PVP、缓冲液洗涤、SDS 与 CTAB 结合使用、高浓度 KAc 低温冻融、高浓度 NaCl 条件下异丙醇沉淀、DNA 完全溶解后加微量RNase A 处理等操作，所得5种基因组 DNA 浓度介于190-970 ng/μL，纯度都很高，皆能被限制性内切酶切割，都可用作模板扩增到细菌16S rRNA 基因片段，以苹果树皮 DNA 为模板扩增到苹果 BIP 和 PDI 基因且苹果树皮基因组 DNA 经测序公司检测，质量满足高通量测序法研究微生物多样性对环境宏基因组的要求。