四重PCR反应体系的建立及在牛肉掺假检测中的应用

• 作者: 周丛 李白玉 王芳妹 蒋伟 钟文涛
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 四重PCR 细胞色素b 牛肉掺假 检测
• 年，卷（期）: 2016,（18）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检疫
• 页码范围: 3574-3577
• 分类号: R155.62|S858
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2016.18.045

摘要

目的:建立马、牛、猪、鸭肉四重聚合酶链式反应(PCR)反应体系,为牛肉掺假检测提供参考.方法:选取马、牛、猪、鸭肉阳性样本,根据线粒体基因组中细胞色素b(cytochrome b)序列,设计多重PCR引物,同时对马、牛、猪、鸭肉进行PCR及电泳检测,建立四重PCR反应体系,并运用该体系对市场40份牛肉制品进行检测.结果:引物比例为马:牛:猪:鸭=1:1:2:1时,46℃退火温度下反应35个循环,四重PCR效果较好;建立四重PCR反应体系,四重PCR条带清晰且亮度较为一致,几乎没有二聚体产生,扩增灵敏度高.根据样品检测结果,烤牛肉串、牛肉丸的掺假率较高,分别为36.4％、75％,牛排未检出除牛肉外的三种动物源成分,但不排除有其他动物源成分的掺入.结论:四重PCR反应体系可用于牛肉掺假检测.