雌激素受体对乳腺癌细胞截短型神经激肽受体-1的调控作用

• 作者: 仝颖娜 刘晓彬 周云丽 张露芳
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 乳腺肿瘤 细胞系,肿瘤 雌激素受体α 受体,神经激肽1 RNA,小分子干扰 染色质免疫沉淀法 细胞增殖 荧光素酶报告基因
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 1409-1413
• 页数: 5页
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20161193

摘要

目的：探讨雌激素受体α（ERα）阳性的乳腺癌细胞中ERα对神经激肽受体-1截短型变异体（NK1R-Tr）的调控作用，以及ERα是否通过调控NK1R-Tr的表达，间接调控细胞的增殖能力。方法染色质免疫共沉淀（CHIP）实验验证ERα是否可以结合到NK1R-Tr启动子上游的ERα反应元件，直接调控NK1R-Tr的表达；荧光素酶报告基因实验验证ERα是否对NK1R-Tr的表达起正性调控作用。Western blot实验和RT-PCR实验检测乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的ERα和NK1R-Tr在蛋白水平和mRNA水平的表达情况；以及在ERα激动剂雌二醇（E2）刺激的条件下，小干扰RNA敲除ERα后，NK1R-Tr在不同水平的表达情况；小干扰RNA敲除NK1R-Tr后，CCK-8和克隆形成实验检测敲除NK1R-Tr的乳腺癌细胞的增殖能力。结果在NK1R-Tr基因启动子上游存在ERα的反应元件，ERα在E2存在条件下作用于该反应元件，对NK1R-Tr的表达起正性调控作用。同样在E2刺激的条件下，敲除乳腺癌细胞MCF-7内源性ERα后，NK1R-Tr在蛋白水平和mRNA水平的表达均下降；且敲除NK1R-Tr的MCF-7细胞增殖能力较未敲除组明显降低。结论在ERα阳性的乳腺癌细胞中，ERα正性调控NK1R-Tr的表达，从而增强细胞的增殖能力。