摘要:
目的 研究银杏叶提取物(EGb761)对Aβ淀粉样蛋白(Aβ25-35)所致的PC12细胞损伤的保护作用.方法 PC12细胞随机分为5组:正常组、模型组及3个剂量实验组(10,20,40 μg·mL-1 EGb761).模型组及实验组经20μmol·L-1 Aβ25-35诱导形成PC12细胞损伤模型.以噻唑蓝法及烟酸己可碱染色检测细胞活力及凋亡率;用紫外分光光度法检测天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase 3)与Caspase 9活性;用免疫印迹技术分析B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)蛋白表达量及蛋白激酶B(AKT)磷酸化水平.结果 与模型组的细胞活力(63.52±6.21)%比较,低、中、高3个剂量实验组的细胞活力分别为(75.43±7.90)%,(83.78±8.39)%,(92.95±9.30)%,均显著提高,差异有统计学意义(P<0.01).与模型组的细胞凋亡率(40.31±4.21)%比较,低、中、高3个剂量实验组的细胞凋亡率分别为(24.89±2.50)%,(15.21±1.63)%,(8.65±0.90)%,3个剂量实验组均显著降低,差异有统计学意义(P<0.01).与模型组的Caspase 3为(1.36±0.14)、Caspase 9为(1.89±0.15)比较,低、中、高3个剂量实验组中Caspase 3分别为(1.12±0.10),(0.91±0.08),(0.80±0.08)、Caspase 9分别为(1.73±0.17),(1.52±0.14),(1.28±0.13),3个剂量实验组活性皆显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).与模型组的Bax为(1.15±0.12)、Bcl-2为(0.20±0.02)比较,低、中、高3个剂量实验组的Bax分别为(1.04±0.10),(0.88±0.10),(0.42±0.04)、Bcl-2分别为(0.31±0.03),(0.87±0.09),(1.02±0.10),Bax蛋白表达量降低、而Bcl-2蛋白表达量升高,差异有统计学意义(均P<0.05).与模型组的PI3K为(0.15±0.01)、AKT为(0.10±0.00)比较,低、中、高3个剂量实验组PI3K分别为(0.26±0.03),(0.40±0.04),(0.42±0.04)、AKT分别为(0.19±0.02),(0.34±0.03),(0.35±0.03),实验组的蛋白表达量及磷酸化水平均提高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 EGb761可抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡,与激活PI3 K/A KT信号通路有关.