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摘要:
旨在构建新疆南部4个地方品种(品系)绵羊,即平原型和田羊(HP)、山区型和田羊(HS)、卡拉库尔羊(KL)和多浪羊(DL)的肌生成抑制素(myostatin,MSTN)基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合表达质粒并在真核细胞中表达。从4种绵羊骨骼肌中提取总RNA,逆转录获得cDNA,PCR扩增MSTN后与pMD18-T载体连接构建重组质粒并测序分析,然后将MSTN(HP、HS、DL和KL)基因插入到融合表达载体pEGFP-N1中,构建真核融合表达重组质粒pEGFP-N1-MSTN,在细胞铺满80%时用脂质体法转染到CHO中,观察EGFP与MSTN蛋白在CHO细胞内融合表达的绿色荧光。结果显示,平原型和田羊、山区型和田羊、卡拉库尔羊和多浪羊MSTN的ORF序列都是1125 bp(不含终止密码子),编码375个氨基酸;与GenBank中MSTN序列比较,与田羊(HS、HP)没有差异;卡拉库尔羊有2个碱基差异,造成2个氨基酸变异;多浪羊有6个碱基的差异,造成4个氨基酸变异。成功构建EFGP和MSTN共表达重组质粒并在真核细胞CHO中得以表达。
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文献信息
篇名 新疆南部和田羊、卡拉库尔羊、多浪羊MSTN基因的真核表达
来源期刊 生物技术通报 学科
关键词 和田羊 卡拉库尔羊 多浪羊 肌生成抑制素 CHO细胞 绿色荧光蛋白
年,卷(期) 2016,(5) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 82-90
页数 9页 分类号
字数 语种 中文
DOI 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.05.011
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李树伟 塔里木大学生命科学学院 23 50 4.0 7.0
2 王海涛 塔里木大学生命科学学院 5 0 0.0 0.0
3 金波 塔里木大学生命科学学院 1 0 0.0 0.0
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和田羊
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多浪羊
肌生成抑制素
CHO细胞
绿色荧光蛋白
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生物技术通报
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1002-5464
11-2396/Q
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北京海淀区中关村南大街12号
18-92
1985
chi
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