酿酒酵母工程菌生物合成白藜芦醇

• 作者: 孙萍 林俊芳 梁景龙 郭丽琼 黄佳俊 黄晓燕
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 白藜芦醇 酿酒酵母 酪氨酸 生物合成 基因表达
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 68-74
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2016.03.009

摘要

目的:构建能以酪氨酸为底物产白藜芦醇的重组酿酒酵母.方法:利用降落-重叠延伸PCR法和一步等温法,将拟南芥的4-香豆酰辅酶A连接酶基因(4cl)、巨峰葡萄的白藜芦醇合酶基因(rs)以及粘红酵母的酪氨酸解氨酶基因(tal)分别构建含有不同抗性筛选标记的附加型酵母表达载体,采用LiAc/SS carrier DNA/PEG法转化酿酒酵母工业型菌株EC1118,通过高效液相色谱法检测重组酵母发酵产物.结果:成功获得酵母工程茵EC1118-H-TTC-K-T4C-TRC,以3 mmol/L酪氨酸为底物,28℃,150 r/min摇床避光发酵5d,发酵液中白藜芦醇的产量为6.1979 mg/L.结论:成功构建一株能以酪氨酸为底物产白藜芦醇的工业型重组酿酒酵母,为白藜芦醇的工业化生产进一步奠定了基础.