蛋白磷酸酶2A 催化亚基α在小鼠胚胎成纤维细胞迁移中的作用研究

• 作者: 刘春 吴刘成 李斌 王庆华 王旭 王生存 邵义祥
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 蛋白磷酸酶2A 小鼠胚胎成纤维细胞 细胞迁移 细胞周期
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 49-54
• 页数: 6页
• 分类号: S852.2
• 字数: 4342字
• 语种: 中文

摘要

利用体外基因敲除技术检测小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblasts，MEFs）周期和迁移能力的变化，探究蛋白磷酸酶2A 的 Cα亚基在 MEFs 细胞迁移过程中的作用。用 Cαfl／fl的纯合子雄鼠与雌鼠1∶2配对，取 E12．5 d 的胚胎制作小鼠胚胎成纤维细胞。利用表达 Cre 重组酶（Ad-Cre-EGFP）以及GFP 荧光蛋白（Ad-EGFP）的腺病毒载体，对 P3代 MEFs 进行感染，分别用 PCR，RT-PCR 和 Western blot方法进行基因型鉴定。同时利用流式分选技术检测感染后 MEFs 的细胞周期的变化，利用细胞划痕试验检测了其细胞迁移能力的变化。结果显示，胰酶消化的方法成功获得了小鼠胚胎成纤维细胞，DNA，RNA 和蛋白水平的鉴定获得了3对3的野生型和基因敲除 MEFs。流式分选发现 Ad-Cre 处理的 MEFs 与 Ad-EG-FP 处理的 MEFs 相比，处于 G2期的细胞比例为30．8％±2．57％，高于 Ad-EGFP MEFs 的23．9％±2．46％，并且细胞碎片的比例也远高于后者。划痕试验表明，Cα亚基缺失后细胞迁移能力下降，12 h 就显著低于对照组。结果表明，腺病毒携带的 Cre 重组酶能够在体外有效地敲除掉 MEFs 中的蛋白磷酸酶2A 的Cα亚基，PP2A Cα亚基的缺失会导致 MEFs 细胞周期倾向于阻滞在 G2期，并会降低细胞迁移的能力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘春	南通大学实验动物中心	51	271	8.0	14.0
2	王旭	南通大学实验动物中心	24	111	6.0	10.0
3	李斌	南通大学附属医院儿科	32	68	4.0	7.0
4	邵义祥	南通大学实验动物中心	71	341	11.0	15.0
5	吴刘成	南通大学实验动物中心	23	50	3.0	6.0
6	王生存	南通大学实验动物中心	14	45	4.0	6.0
7	王庆华	南通大学实验动物中心	13	22	2.0	4.0