猪博卡病毒VP1蛋白抗原表位分析及其克隆表达

• 作者: 何启盖 刘雪岭 孟宪荣 库旭钢 张晶 栗绍文 毕丁仁 黄宝慧
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪博卡病毒 VP1蛋白 抗原表位预测 原核表达
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 96-99
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3090字
• 语种: 中文

摘要

为研究猪博卡病毒(PBoV) VP1蛋白在血清学诊断中的作用,用DNAStar软件预测了PBoV NP08株(GenBank登录号KR014255.1)VP1蛋白的主要抗原表位,确定1-334个氨基酸为优势抗原表位区,构建重组质粒pET32a-VP1,将其转化感受态细胞BL21 (DE3),并进行IPTG诱导表达.结果表明,重组菌可表达分子量为56.7 ku的重组蛋白VP1,主要以包涵体形式存在.纯化后蛋白的Western blot结果表明,表达的VP1蛋白与临床阳性血清具有良好的反应性.用该蛋白包被ELISA板,检测10份临床感染PBoV的猪血清样品和3份未感染猪的血清,结果表明其具有很好的特异性,不与未感染猪的血清发生反应,为建立PBoV感染血清学诊断方法奠定了基础.